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抗血清的特異性是指抗血清對相應的抗原及近似的抗原物質的識別

2.特異性測定 抗血清的特異性或稱轉移性是指抗血清對相應的抗原及近似的抗原物質的識別能力。特異性好就是抗血清的識別能力強。通常,特異性是以交叉反應率來表示的。交叉反應率低,表示抗血清的特異性好,反之則特異性差。交叉反應率一般是用競爭抑制曲線來判斷的。以不同濃度的抗原和近似抗原物質分別做競爭抑制曲線,計算各自的結合率(B/T或B/B0),求出各自在IC50時的濃度,按下列公式計算交叉反應率。

抗血清的特異性是指抗血清對相應的抗原及近似的抗原物質的識別

S=y/Z×100%

S:交叉反應率,y:IC50時抗原濃度,Z:IC50時近似抗原物質的濃度。

如某抗原的IC50濃度為90Pg/管,而一些近似抗原物質IC50濃度幾乎是無限大,可以說這一抗血清與其它抗原物質的交叉反應率近似零,即無交叉反應,該抗血清的特異性是好的。

3.親合力 在免疫學中, 親合力是指抗體與結合抗原體的活度或牢固度。抗體與抗原結合疏鬆,結合後會迅速解離,稱為親合力低,反之,親合力高。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結合位點與抗原的決定基之間的立體結構性的合適程度決定的。親合力常以親和常數K表示。K的單位是升/摩爾(L/mol)。在RIA中,K是該抗血清能達到的最小檢出量(靈敏度)的倒數,K=1/[H],[H]是最小檢出量,通常,K的範圍在108~1012L/mol之間,也有高達1014L/mol的。

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計算親合常數的方法20餘種,計算出的K都不能真實反映實驗情況,只能作為參考。

(七)免疫失敗的可能原因及應採取的措施

有時不能獲得滿意的抗血清,可從下列幾方面找原因,並改進之。

(1)免疫動物的種屬及品系是否合適,可考慮改變動物的種屬或品系,或擴大免疫動物的數量。

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(2)抗原質量是否良好,可改用其它廠家的產品或改用同一廠家的其它批號,也可考慮改變抗原分子的部分結構,或改進提取方法。

(3)製備的免疫原是否符合要求,可從偶聯劑,載體、抗原或載體的比例、反應時間等多方面去考慮,並加以改進。

(4)所用的佐劑是否合適,乳化是否完全,可改用其它佐劑,或加強乳化。

(5)免疫的方法、劑量,加強免疫的間隔時間和次數,免疫的途徑是否合適。

(6)動物的飼養是否得當,如營養(飼料、飲水)、環境衛生(通風、採光、溫度)是否符合要求,動物的健康情況是否良好等。

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